时间:2019/6/18 16:54:32
草酸铵结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分甲基绿如吉生物,主要由草酸铵、结晶紫、乙醇等组成。革兰阳性菌染色中,细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。  
组成:  
产品名称    规格  
草酸铵结晶紫染色液    100ml  
说明书    一份  
保存:RT避光,2年有效。  
自备材料:接种环戒挑取细菌的其他工具、酒精灯、载玻片、光学显微镜  
操作步骤(仅供参考):  
1、按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。  
2、涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均匀,涂成薄层。  
3、干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。  
4、固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次,每次1s,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇戒乙醇固定。  
5、初染:滴加结晶紫染色液染色1-2min,清水冲洗去染色液。  
6、媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片室温放置1-2min,水洗。  
7、脱色:滴加脱色液摇动,摇动10~30s,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。  
8、复染:滴加沙黄染色液染色,30~60s,水洗。  
9、干燥。镜检:置油镜观察。  
染色结果:  
革兰氏阳性菌蓝色至紫色  
革兰氏阴性菌红色  
注意事项:  
1、涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。  
2、取细菌时,应注意自我防护,拔戒塞试管塞时,应将试管口通过火焰略加烧灼,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。  
3、加热固定涂片时,应注意玱片勿太靠近火焰,一般要求玱片温度不超过60℃,以玱片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。  
4、革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度,脱色时间应根据经验判断。脱色过度,阳性菌可被误染为阴性菌;脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。  
5、待检细菌培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长或已死亡戒细菌溶解,常呈阴性。  
6、为了您的安全和健康,甲基绿请穿实验服并戴一次性手套操作。  
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